茶樹菇可分春秋兩季栽培。栽培季節安排要根據當地的氣溫變化規律，選擇適當時間栽培。實踐證明，在高溫季節溫度降至24℃，低溫季節溫度上升至18℃時，將形成大量子實體，因此，春栽宜當地氣溫穩定在18℃時往前推2個月接栽培袋，秋栽氣溫穩定在24℃往前推2個月接栽培袋。廣東一般4—6月和9—11月出菇較為理想，在高海拔LU區7—8月亦可正常出菇，在冬季春初適當保溫亦可出菇。
(一)菌種制作。栽培種制作時間，等于制栽培袋的用種日期向前推栽培種培養所需天數，原種制作時間等于栽培種制作日期向前倒推原種培養實際開天數，同樣方法，可計算出母種制作時間。茶樹菇菌種在相同培養條件下，不同的培養基所需的培養時間差異較大。
1.母種制作：茶樹菇母種，常從栽培的子實體或野生子實體中，選擇生長良好、朵形圓整的用作組織分離材料。組織分離獲得的菌株再經適應性試驗，篩選出綜合經濟性狀優良的菌株，用以示范推廣。
母種培養基配方及制作：
配方1：馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、水1000毫升，自然pH。
配方2：馬鈴薯200克、葡萄糖5克、蔗糖5克、瓊脂20克，麩皮50克(煮汁)、硫酸鎂0.15克、水1000毫升、自然pH。
按常規配制、分裝、滅菌、制斜面備用。
分離培養。在無菌條件下，將菌柄剪短、縱切掰開，在菌柄與菌蓋連接處，切取組織一小塊移接到斜面培養基上。置于25±2℃恒溫箱中培養，菌絲長滿斜面即為母種。
2.原種、栽培種制作培養：
培養基及制作：原種常用麥粒培養基或木屑培養基，用蘑菇瓶分裝。栽培種因用種量大，常用木屑為主要原料作培養基，用聚丙烯袋分裝，木屑培養基與栽培料配方相同。將原料加水拌勻(麥粒需浸、煮)，然后分裝入瓶、袋中，壓實。中間打一孔穴，掃凈瓶袋粘著物，制好棉塞，按常規滅菌、冷卻。
接種培養：在無菌條件下接入母種(或原種)，每支母種可接原種5瓶左右，栽培種40—45天培養，菌絲可長滿瓶(袋)。
